平板划线法探究莲花锌（纳米级活性多孔氧化锌）体外抑菌效果

  纳米氧化锌是一种常见的新型无机抗菌剂，被广泛应用于各个行业中。在动物营养领域，纳米氧化锌可作为饲料添加剂应用于动物生产中，起到提高生产性能、防腹泻等作用。

  莲花锌是一种新型改良的纳米级活性多孔氧化锌，本试验通过平板划线法探究莲花锌的体外抑菌能力，以期直观展示莲花锌抑菌效果。

一、材料与方法

1、试验材料

  ✦ 莲花锌：纳米级活性多孔氧化锌（有效含量为75%，比表面积为54g/m2），取自吉隆达生物科技集团有限公司；

  ✦ 指示菌：金黄色葡萄球菌（CICC10001）、大肠埃希氏菌（CICC10003）购自中国工业微生物菌种保藏管理中心；

  ✦ 培养基：营养琼脂；

  ✦ 试验器材：霉菌培养箱、高压灭菌锅、水浴恒温振荡器、紫外分光光度计、一次性平板、接种环。

2、指示菌的活化

  将指示菌经37℃、180r/min摇床培养活化后，使用紫外可见光分光光度计测量OD值，当OD值在0.50左右时停止培养。

3、平板划线法

  将莲花锌按所需比例加入营养琼脂培养基中，高温高压灭菌1h，制作成平板培养基后，划线接种指示菌，37℃恒温培养24h，观察指示菌生长情况。试验分为3组：0.00%组（营养琼脂）、0.10%组（营养琼脂+0.10%莲花锌）、1.00%组（营养琼脂+1.00%莲花锌），每组设2平行。

二、结果与分析

  纳米氧化锌的抑菌效果如表1所示。0.00%组有明显的致病菌生长，0.01%组有少量致病菌生长，1.00%组无致病菌生长。

表1：纳米氧化锌的抑菌效果

三、讨论

  目前对纳米氧化锌的抑菌机制主要存在3种说法：

1.接触吸附机理：

  通过纳米氧化锌对微生物的吸附作用，破坏细胞膜，导致蛋白质变性，从而起到抑制或杀死微生物的作用；

2.金属离子溶出机理：

  纳米氧化锌在接触细菌细胞膜时，释放出Zn2+，破坏细胞膜结构和包内蛋白质，使细胞合成酶失活，细胞因丧失增殖能力而死亡；

3.光催化机理：

  纳米氧化锌在紫外光的作用下，产生氧化性很强的羟基自由基（-OH）、过氧离子自由基（-O2-）和-HO2 自由基，破坏细菌细胞分裂增殖能力，达到抑菌或杀菌的作用。

  莲花锌作为一种改良的纳米级活性多孔氧化锌，抑菌机理与纳米氧化锌相同。

四、小结

  莲花锌对致病菌有良好抑菌效果，浓度为0.01%时可大量抑制致病菌生长，浓度为1.00%时可完全抑制致病菌生长。

  四川吉隆达生物科技集团有限公司，在全球拥有近2000家客户，产品覆盖30多个国家和地区。涉及添加剂饲料，生物饲料添加剂，蛋鸡饲料添加剂，市场占有率达20%。